在1×TBE中分别用GelRed和EB预制1%琼脂糖凝胶中1KbPlusDNALadder稀释物的电泳图。从左至右各泳道DNA总量分别为:200ng,100ng,50ngand25ng。凝胶用300nm透视器显像,用EB滤光片和Polaroid667黑白胶片拍照
美国BIOTIUM公司技术专家研发,由南京森贝伽生物提供的GelRedTMNucleicAcidGelStain,10,000Xinwater说明书是种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。(下载美国LitronLaboratories,Inc.完整安全检测报告)
TableA.订货信息
Cat#
ProductName
UnitSize
品牌
41001
GelRedTM?NucleicAcidGelStain,3Xinwater
4.0L
Biotium
41002
GelRedTM?NucleicAcidGelStain,10,000XinDMSO
0.5mL
Biotium
41003
GelRedTM?NucleicAcidGelStain,10,000Xinwater
0.5mL
Biotium
41003-1
GelRedTM?10,000Xsolutioninwater,bulkpack
10mL
Biotium
41004
GelGreenTM?NucleicAcidGelStain,10,000XinDMSO
0.5mL
Biotium
41005
GelGreenTM?NucleicAcidGelStain,10,000Xinwater
0.5mL
Biotium
想了解更多可点击链接GelRedandGelgreen核酸凝胶染料http://www.sbjbio。。com/Products/D13380.html
目前大多数商业化的核酸染料(凝胶染色试剂)总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意。例如,虽然EB(溴化乙啶)作为目前使用zui广泛的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号(如图1)。SYBRGreenI和SYBRGold也被厂家宣传为zui灵敏的凝胶染色试剂。但SYBRGreenI尤其是SYBRGold在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBRsafe被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及SYBRGreenI。
至于国内有公司宣称的新产品Goldview,我们不想多加评论。因为从极为相似的对比试验结果来看,该产品似乎就是AO(丫啶橙,一种剧毒产品,且荧光亮度不佳)。请看Goldview与AO对比试验结果(其中Goldview是从国内某公司采购,AO则来自SIGMA,报告来自开放生物)
Biotium公司的GelRedTMNucleicAcidGelStain,10,000Xinwater说明书无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色,都表现出了极高的灵敏度。为配合312nmUV凝胶成像系统而设计的GelRed,在使用了我们新开发的具有的试验步骤后(该试验步骤中使用稀释的NaCl溶液替代传统的TBE缓冲溶液),在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于SYBRGold。但与SYBRGold不同,GelRed在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度,事实上GelRed在检测低浓度、微量DNA方面比EB表现出更高的灵敏度,尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏(图1)。GelGreen可以满足使用488nm激光凝胶扫描仪或者可见光激发的DarkReader的研究人员的使用要求。GelGreen无论是在预制凝胶还是凝胶电泳后染色中都与SYBRGreenI灵敏度相当,但不存在后者的不稳定性问题。实际上,GelRed和GelGreen,特别是GelRed非常稳定,可以长期在室温下保存。当这两种染料稀释在TBE或者类似的电泳缓冲溶液中时甚至可以使用微波炉加热,便于采用常规方法制备预制凝胶。含有染料的预制凝胶可以成批制备,长期保存。
同样重要的是,GelRedTMNucleicAcidGelStain,10,000Xinwater说明书相比EB或SYBRGreenI提高了安全性。独立的测试服务公司(LitronLaboratories,Inc.)进行的标准艾姆斯氏测试结果表明,在18.5μg/mL(该浓度远高于推荐用于电泳后染色的约4μg/mL的3X染色液)浓度下,GelGreen没有诱变性,而GelRed也仅在S9代谢活化时有微弱的诱变性。GelRed和GelGreen的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞,正是这一特性降低了染料的细胞毒性。如图3。相反,SYBRGreenI广泛地用于活细胞线粒体和核DNA染色,这正是由于它能快速的被细胞吞入。由于已知SYBRGreenI对紫外线导致的突变有强烈的增强作用(Ohtaetal.Mutat.Res.492,91(2001)),因此它的高细胞膜透性使它在紫外环境观察时成为凝胶染色的主要有害物质。
特性:
gelred高灵敏度
GelRedTMNucleicAcidGelStain,10,000Xinwater说明书是目前市场中zui灵敏的凝胶核酸染料
gelred稳定性极好
可以使用微波炉加热,可以在室温下保存
gelred更安全
艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB)
gelred广泛的适应性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色
gelred染色过程简单
与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗
gelred对DNA和RNA的迁移影响极小
对核酸迁移的影响小于SYBRGreenI
gelred与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置*兼容
使用312nm激发的UV凝胶成像系统时,GelRed可以*的替代EB;使用254nm激发的UV凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen足以替代任意一种SYBR染料(见图4中的光谱图)
安全性测试
SYBRDyes
GelRed
GelGreen
A)5min.incubation
要想让DNA染色剂安全,*的办法就是设法不让其穿透细胞膜进入活体细胞内,Biotium做到了!
B)30minincubation
图3.在37°C下,分别使用1XSYBRGreenI,SYBRSafe,GelRedandGelGreen对HeLa细胞进行孵化,并分别在5分钟(A)和30分钟(B)后观察。实验显示SYBR染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色(以上仅图示SYBRGreen1),而GelRed和GelGreen则因为不能穿透细胞膜而完全没有进入细胞内,足以证明GelRed和GelGreen是安全的。
图4.GelGreen(绿色)GelRed(红色)在PBS缓冲溶液中结合dsDNA后的激发和发射光谱。
图5.室温下,GelRedTM(500nm)和SYBRGold(488nm)稀释在1×TBE凝胶染色液中测得的吸光度随时间变化图。GelRed和SYBRGold初始的吸光度值分别为0.029和0.051。
TableB.以下标签可以极好地配合以上产品使用:
Cat#
ProductName
UnitSize
品牌
31021
1KBDNALadder(100ng/uL)
30ug/300ul
Biotium
31022
Ready-to-Use1KBDNALadder
150applications(1.5ml)
Biotium
**一次购买5个包装以上可获得更优惠价格,立刻我们的。
郑重声明:凡是市场上声称具有与Gelred和Gelgreen相同特性的EB替代品,且不指明是Biotium公司品牌的核酸染料,经检验都是通过Gelred或Gelgreen稀释后重新包装的水货,染色质量远不及Biotium原包装产品。我们鄙视这种损害客户利益的行为,并坚决打击,发现一次我们将不再向其供货!在此,我们呼吁用户在购买Biotium公司产品时,请选择正规经销商。
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